Энзоотический лейкоз крупного рогатого скота
Энзоотический лейкоз крупного рогатого скота (лат. — Bovineleucosis; англ. — Leukaemiaincattle; синонимы: гемобластоз, белокровие, лейкемия, рак крови)
Определение болезни
Лейкоз крупного рогатого скота — хроническая вирусная инфекционная болезнь, протекающая чаще бессимптомно, с развитием необратимого инфекционного процесса, проявляющегося персистентным (от лат. persisteus — сохранившимся, оставленным) лимфоцитозом, злокачественным разрастанием кроветворных и лимфоидных клеток с нарушением их способности к морфологической дифференцировке и физиологическому созреванию, с последующей диффузной инфильтрацией органов этими клетками или образованием опухолей.
Историческая справка
Лейкоз у человека описал и выделил в самостоятельную нозологическую единицу в 1845 г. немецкий морфолог Р. Вирхов в Германии под названием лейкемия (от гр. Leucos — белый + haima - кровь). Болезнь характеризовалась стойким увеличением в крови больных людей числа лейкоцитов. Первый случай лейкемии у лошади описан патологоанатомом Дрезденского ветеринарного института А. Лейзерингом в 1858 г., лейкоз крупного рогатого скота подробно описал в 1878 г. О. Зидамгродский. Как болезнь опухолевой природы лейкоз впервые был представлен в работах русских ученых К. Словянского и А. Щастного (1875). Длительное время этиология лейкоза оставалась неизвестной и лишь в 1969 г. J. Miller и соавт. окончательно установили вирусную природу лейкоза у крупного рогатого скота.
Распространение болезни
Лейкоз крупного рогатого скота регистрируется во всех странах мира, особенно с развитым молочным скотоводством (Дания, Швеция, Голландия, Израиль, США и др.). Возникновение лейкоза в нашей стране связано с завозом импортного крупного рогатого скота в 1940, 1945-1947 гг. из Германии. Наибольшее распространение болезнь в республике получила в конце 80-х гг. XX столетия. В эти годы в 98 % хозяйств республики выявлялся реагирующий в РИД крупный рогатый скот. При этом реагировало положительно в РИД около 20 % поголовья коров и 7 % поголовья молодняка крупного рогатого скота общественного сектора и более 10 % коров, принадлежащих населению. В последнее время лейкоз крупного рогатого скота в республике имеет незначительное распространение. Инфицированность вирусом лейкоза коров и молодняка общественного сектора не превышает 0,1 %, а принадлежащего населению — не более 0,4 %:
Экономический ущерб
Возникновение лейкоза крупного рогатого скота ставит под угрозу сохранение племенных животных, ведение селекционно-племенной работы, а также продажу и обмен животными. Экономический ущерб от этой болезни складывается из потерь, связанных с выбраковкой инфицированных вирусом лейкоза животных, недополучением мясной и молочной продукции, а также затрат на утилизацию туш, проведение диагностических исследований и комплекса мероприятий по профилактике и ликвидации болезни.
Этиология
Возбудителем лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) является экзогенный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Deltaretrovirus подсемейству Oncornavirinae типа С. Возбудитель лейкоза крупного рогатого скота репродуцируется в перевиваемых, хронически инфицированных культурах клеток животных разных видов (овцы, крупного рогатого скота, свиньи, летучей мыши, крысы, собаки, обезьяны и человека). Он может длительное время (пожизненно) находиться в клетке хозяина частично или быть полностью связанным с ее геномом. По своему строению и функциональным особенностям ВЛКРС подобен вирусу Т-клеточного лейкоза человека, однако, в отличие от него, поражает В-лимфоциты. Установлена определенная гомологичность геномов обоих вирусов, предполагают, что эти вирусы имеют общего предшественника. Возбудитель лейкоза обладает слабой устойчивостью к физическим и химическим факторам. Он инактивируется при температуре +56 °С в течение 30 мин, при +60 °С 1 мин, а при кипячении — моментально. Пастеризация молока при +76 °С надежно инактивирует вирус в течение 20-30 с. Вирус погибает при повторном замораживании и оттаивании, под действием обычных дезсредств в невысоких концентрациях (2%-е растворы гидроксида натрия, формальдегида) и прямых солнечных лучей (через 4 ч). В жидком азоте, а следовательно, и в замороженной сперме, вирус сохраняется несколько лет.
Эпизоотологические данные
Восприимчив к ВЛКРС крупный рогатый скот. При тесном контакте с больным лейкозом крупным рогатым скотом ВЛКРС может передаваться буйволу, канибаре, овце и зебу. Чувствительными к вирусу в экспериментальных условиях оказались буйвол, овца, коза, свинья, кролик, лошадь, обезьяны макака- резус и шимпанзе. В отношении восприимчивости человека к ВЛКРС существуют противоположные точки зрения. Вместе с тем гомологичность генов ВЛКРС и Т- клеточного лейкоза человека, экспериментальное воспроизведение лейкоза крупного рогатого скота соответствующей болезни у макака-резус и шимпанзе, установление способности ВЛКРС культивироваться на культурах клеток человека указывают на определенную опасность вируса для человека. Восприимчивость к ВЛКРС зависит от возраста, чаще лейкоз диагностируется у крупного рогатого скота в возрасте 4-8 лет. Телята, полученные от реагирующих по РИД (ИФА) коров, в 90-97 % случаев могут рождаться свободными от ВЛКРС, а от коров с клиническим и гематологическим проявлением болезни — в 80-82 % случаев. До 6 месяцев телята благодаря колостральному иммунитету не заболевают лейкозом.
Установлена следующая возрастная восприимчивость крупного рогатого скота к ВЛКРС: в возрасте 7-12 месяцев она может достигать до 8,1 %; в 13-18 месяцев до 11,5 %; в 19-24 месяцев — до 18 %; к 4-9 годам до 68 %. Гематологическое проявление болезни наступает не раньше двухлетнего возраста, а опухолевое — к 4-9 годам. Восприимчивость к ВЛКРС зависит и от породы животного. Так, наиболее восприимчивы к лейкозу красная литовская, красная датская, черно- пестрая, буро-латвийская, красно-белорусская породы. Менее восприимчивыми являются симментальская, костромская и швицкая породы крупного рогатого скота. Заболеванию лейкозом способствуют близкородственное разведение, плохие условия кормления и содержания, особенно животных с высоким генетическим потенциалом (удой коров, инфицированных вирусом лейкоза, выше, чем в среднем по стаду).
Источником возбудителя инфекции являются больные и инфицированные вирусом лейкоза животные. Начиная с инкубационного периода, вирус выделяется из организма с молоком, молозивом и другими секретами и экскретами, содержащими лимфоциты. Однако они не играют основной роли в передаче ВЛКРС от больного животного здоровому. Основная роль в выделении и передаче вируса от больных животных здоровым принадлежит лимфоцитам больного животного. Риск инфицирования существует уже при незначительном остаточном количестве крови (0,0005 мл) больного животного, содержащего 2500 инфицированных лимфоцитов на инструменте. В связи с этим передача вируса может происходить при использовании одного и того же инструмента для проведения вакцинации, взятия крови, искусственного осеменения, татуировки, мечения больного лейкозом и здорового животного. Указанные причины передачи ВЛКРС называются ятрогенными (от гр. — iatros — врач + gennao — порождаю), возникающие как реакция на неправильное поведение врача.
Передача вируса может осуществляться при использовании одного доильного аппарата для больных и здоровых животных, а также при неправильном взятии крови, когда здоровая корова слизывает кровь от больной при попадании последней на кормушки, пол и другие предметы. К 8-9-месячному возрасту молодняк крупного рогатого скота может подвергаться 20-30 ветеринарным и зоотехническим обработкам, при которых вирус может передаваться от больного животного здоровому. Передавать вирус могут чесоточные клещи и жалящие насекомые. Таким образом, при наличии в стаде больного лейкозом животного (хотя бы одного) существует реальная угроза передачи вируса здоровым животным. Вторым по значению фактором передачи является контаминированная ВЛКРС сперма быков-производителей. Сперма от инфицированных ВЛКРС быков не содержит вирус только при отсутствии в ней крови (до 0,0005 мл), а именно лимфоцитов, что бывает редко. Разного рода патологии (ИРТ, ПГ-3, хламидиоз и др.) с поражением половых органов у быков приводят к появлению в их сперме лимфоцитов, которые могут быть носителями ВЛКРС. Особую опасность представляют быки, инфицированные ВЛКРС, при использовании их для естественной случки.
Один бык дает до 50 тыс. доз спермы в год, которая может храниться до 10 лет. В 10-20 % случаев возможно внутриутробное заражение телят. Занос возбудителя ВЛКРС в хозяйство происходит преимущественно: при завозе в хозяйство животных -вирусоносителей (РИД+, ИФА+) или находящихся в инкубационном периоде, который может продолжаться до года); при использовании контаминированной ВЛКРС спермы для искусственного осеменения; при использовании гипериммунной сыворотки или сыворотки- реконвалесцентов, содержащей ВЛКРС; при использовании не пастеризованного обрата и другими путями. Сезонность болезни не выражена. Для лейкоза крупного рогатого скота характерна стационарность, которая обусловлена длительным вирусоносительством, которое может продолжаться всю жизнь, а также наличием в неблагополучном стаде животных, находящихся в инкубационном периоде, который может продолжаться до одного года. Лейкоз протекает в виде энзоотий. Заболеваемость до 68 %. Летальность — до 15 %. Особенностью эпизоотического процесса является то, что при лейкозе крупного рогатого скота нет стадии угасания эпизоотического процесса, если не вмешивается в это человек.
Патогенез
При лейкозе сложен и до конца не изучен. Заражение крупного рогатого скота достигается преимущественно парентеральным путем в результате попадания лимфоцитов больного животного (инфицированного вирусом лейкоза) в организм здорового. В организме вирус может находиться длительное время в клетках хозяина частично или полностью связанным с его геномом. В проявлении канцерогенного эффекта вируса и активизации инфекционного процесса играют роль иммунный статус организма, воздействие на него стресс-факторов (действие на организм различных химических веществ, радиации и др.) и генетическая предрасположенность отдельных пород и линий животных к ВЛКРС. Различают следующие стадии (периоды) инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота: инкубационная (бессимптомного инфекционного процесса); гематологическая; опухолевого проявления болезни. Инкубационная стадия. Развитие инфекционного процесса при попадании ВЛКРС в организм крупного рогатого скота происходит только у животных старше 6 месяцев. В организме у телят до шестимесячного возраста репродукция вируса не происходит, иммунная защита в этот период обеспечивается колостральным иммунитетом.
Инкубационная стадия продолжается с момента заражения до появления антител к вирусу лейкоза и может длиться от 30 до 90 суток (в отдельных случаях до года). Таких животных не выявляют с помощью серологических реакций (РИД, ИФА) которые базируются на выявлении антител, но они в этот период выделяют вирус и могут быть источником возбудителя инфекции. За инкубационной стадией развития инфекционного процесса наступает бессимптомная стадия, которая проявляется в форме иммунного ответа на заражение ВЛКРС, т. е. имеет место вирусоносительство и антитело- носительство (в организме животного одновременно циркулируют ВЛКРС и соответствующие антитела). Такое состояние может возникнуть у животных старше 6 месяцев и при отсутствии генетической предрасположенности или иммунологического дефекта, продолжаться всю жизнь.
Если же имеет место влияние различных экзогенных и эндогенных факторов (генетическая предрасположенность или иммунологический дефект), происходит активизация вируса, проявляющаяся у отдельных животных медленным расстройством регуляции функции органов кроветворения. При этом чаще поражаются лейкобласты, что может привести к развитию гематологической стадии инфекционного процесса, характеризующейся персистентным лимфоцитозом на суб- и лейкемическом уровне. В это время в крови больных животных происходит интенсивное увеличение количества лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов (свыше 10-13 тыс./1 мкл). Гематологическая стадия болезни развивается не ранее двухлетнего возраста. Более глубокое расстройство регуляции функции органов кроветворения может привести к интенсивной пролиферации различных типов лейкоцитов: в кроветворных органах; в костном мозге; в селезенке; в лимфоузлах. Неконтролируемо размножаясь, эти клетки крови распространяются по организму, попадают в различные органы и ткани, образуют опухоли, вызывают изменения структуры и функции пораженных органов вследствие атрофии специфических клеток, т. е. имеет место развитие опухолевой стадии болезни, которая обычно развивается у животных к 4-9 годам. Вирус лейкоза обладает выраженным иммунодепрессивным действием, и такое состояние приводит к заболеванию больных лейкозом животных туберкулезом и другими болезнями.
Течение и симптомы болезни
Клинические признаки при лейкозе не характерны, болезнь протекает чаще бессимптомно. Различают следующие периоды проявления симптомов: инкубационный период (от попадания ВЛКРС в организм до появления антител, выявляемых серологическими реакциями) от 60-90 дней до одного года; бессимптомная стадия определяется временем от обнаружения антител к ВЛКРС до появления гематологических изменений, характеризующихся персистентным лимфоцитозом. В эту стадию видимых клинических признаков у животных не обнаруживают. Длительность бессимптомной стадии от нескольких месяцев до 3 лет и более; клинико-гематологическая стадия характеризуется гематологическими изменениями на алейкемическом, суб- и лейкемических уровнях.
Сублейкемическая картина крови характеризуется увеличением количества лейкоцитов до 40 тыс. в 1 мкл с преобладанием лимфоидных форм и повышением содержания в лейкоцитарной формуле молодых малодифференцированных клеток. В эту стадию у животных обнаруживают отдельные клинические признаки болезни; опухолевая стадия болезни проявляется нарушением функций пораженных органов, более отчетливым проявлением клинических признаков. Она развивается у 3-5 % животных старше 4-5-летнего возраста. Клиническую стадию лейкоза часто устанавливают зимой, в конце стельности и в начале лактации. Это объясняется снижением резистентности организма. В зависимости от стадии болезни и степени поражения различных органов при лейкозе обнаруживают: увеличение поверхностных лимфатических узлов (подчелюстных, околоушных, предлопаточных, надвыменных, коленной складки и др.). Они безболезненны, подвижны, эластичны или плотной консистенции. Одновременное и равномерное увеличение двух симметрично расположенных лимфоузлов отмечается достаточно редко. Обычно они увеличены сначала с одной стороны, а затем с другой.
Иногда в области голодной ямки, на грудной клетке, в подгрудке, на ребрах, лопатке обнаруживают мелкие, размером до голубиного яйца подкожные лимфоузлы;ослабление сердечно-сосудистой деятельности (отеки в области подгрудка, живота, вымени и межчелюстного пространства); расстройство пищеварения (периодические запоры или поносы); умеренное или сильное увеличение селезенки и печени, границы которых определяются перкуссией. Селезенка может достигать размеров 100x30x10 см, возможен ее разрыв; иногда хромоту, в 3-5 % случаев одно- или двустороннюю экзольфтальмию (пучеглазие); при ректальном исследовании — увеличение лимфатических узлов тазовой полости, глубоких паховых, а при вовлечении в инфекционный процесс матки — утолщение ее стенки; у телят — опухолевидное разрастание в зобной железе. В редких случаях диагностируют кожную форму болезни. На шее, спине, крестце и бедрах появляются узелковые припухлости по 2,5 см в диаметре. В течение нескольких недель происходит облысение припухлости, ее поверхность покрывается корочкой, состоящей из эпителия и экссудата. Затем корочка отпадает, облысевшие участки вновь покрываются шерстью. Однако через несколько месяцев наступает рецидив с появлением тех же признаков лейкоза. Заболеваемость при опухолевой форме лейкоза может достигать 70 %, летальность не более 15 %
Патологоанатомические изменения
Обнаруживают у животных, находящихся в опухолевой стадии болезни, которая развивается к 4-9 годам жизни у 3-5 % животных. При вскрытии трупов и послеубойной экспертизе туш и органов при лейкозе отмечают: 1. Гиперплазию лимфатических узлов. Они достигают громадных размеров, не сращенные с окружающими тканями, весят до нескольких килограммов. На разрезе они сочные и саловидные, паренхима белого или серого цвета. 2. Гиперплазию селезенки. Иногда в ней наблюдают разроет опухолевой ткани в виде узлов. У отдельных животных она достигает длины 1 м и ширины 20-35 см. Пульпа красная сплошь или с крупными белыми фолликулами, четко выступающими на красном фоне. 3. Разрастание опухолевой (лейкозной) ткани в стенке сычуга, рубца, в почках, печени, скелетной мускулатуре, диафрагме и других органах. 4. Истощение и общую анемию. При гистоисследовании в кроветворных органах устанавливают очаговую или диффузную инфильтрацию лимфоцитами, атрофию паренхимы.
Диагностика
Базируется на учете эпизоотологических данных, симптомов болезни, патологоанатомических изменений, результатов гематологических, серологических и гистологических исследований. Клинические признаки не специфичны, патологоанатомические изменения развиваются к 4-9 годам жизни животного и только у 3-5 %. Характерные гематологические изменения у животных появляются на поздних стадиях инфекционного процесса, т. е. они слабо информативны. Основным методом прижизненной диагностики лейкоза крупного рогатого скота является серологический с использованием реакции иммунодиффузии (РИД) и иммуноферментного анализа (ИФА) для выявления специфических антител. Допускается использование полимеразноцепной реакции (ПЦР), позволяющей выявлять провирус лейкоза в организме животного. Инфицированньми вирусом лейкоза признают животных, у которых в крови обнаружены специфические антитела к ВЛКРС одним из серологических методов (РИД или ИФА) или провирус лейкоза (ПЦР). Иммуноферментный анализ (ИФА) используется для обнаружения антител в сыворотке крови, а также в объединенных пробах молока из благополучных по лейкозу хозяйств. В лабораторию для серологического исследования направляют сыворотку крови животных. При этом учитывают следующее: телята в раннем возрасте могут содержать в крови пассивные (колостральные) антитела.
Чтобы исключить ложноположительные результаты РИД, серологическому исследованию на лейкоз подвергают животных в возрасте 6 месяцев и старше. Животные, которым вводили вакцины или другие биопрепараты, подлежат исследованию спустя 15-20 дней, так как могут быть получены ложноположительные результаты; в период 1 месяц до и после родов у отдельных инфицированных ВЛКРС коров, в связи с переходом большого количества антител в молозиво — молоко, уровень антител в крови может понижаться и с помощью РИД их не удается выявить.
Дифференциальная диагностика лейкоза крупного рогатого скота базируется на использовании серологических методов. При этом лейкоз следует дифференцировать от туберкулеза, паратуберкулеза, актиномикоза, а также от болезней незаразной этиологии (гепатиты, нефриты, ретикуло- перикардиты).
Лечение. Не разработано
Специфическая профилактика
В СССР вакцина адсорбированная инактивированная против лейкоза крупного рогатого скота впервые была разработана в Институте им. А. Кирхенштейна Академии наук Латвийской ССР в 1980 г. В России ведутся исследования по получению живой рекомбинантной поксвирусной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота, которая представляет собой рекомбинантный вирус осповакцины на основе штамма WR. Причинами слабого внедрения в ветеринарную практику указанных вакцин является низкая их иммуногенность. Это связано с особенностью иммунитета при лейкозе, которая заключается в том, что антитела не способны элиминировать вирус лейкоза, который присутствует в инфицированных лимфоцитах в непродуктивном состоянии (частично или полностью связан с геномом хозяина) и защищен от действия антител. Кроме того, надежных тестов для дифференциации поствакцинальных антител от тех, которые образуются после заражения животных полевым вирусом лейкоза, нет.
Мероприятия по профилактике и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота
С целью профилактики лейкоза проводят общие ветеринарно- санитарные мероприятия, которые включают: недопущение завоза животных из хозяйств, неблагополучных по лейкозу крупного рогатого скота; 30-дневное карантинирование вновь завезенных животных с серологическим исследованием их сыворотки крови на лейкоз; строгое соблюдение правил асептики и антисептики при ветеринарных и зоотехнических обработках животных и сроков проведения плановых диагностических исследований; проведение регулярной профилактической дезинфекции и др. Благополучными по лейкозу считают хозяйства (фермы, отделения, стада, дворы), в которых серологическими исследованиями на протяжении двух лет и более не выявлено животных зараженных вирусом лейкоза, а также не зарегистрировано клинических или опухолевых случаев болезни. Благополучным по лейкозу считают район, область, где не регистрируются опухолевые формы лейкоза по данным боенской статистики и 99,8 % стад признаны в официальном порядке благополучными по лейкозу крупного рогатого скота.
В благополучных хозяйствах серологические исследования (ИФА) коров проводят с интервалом один раз в 2 года; нетелей — перед вводом в основное стадо. Серологические исследования (ИФА) быков-производителей госплемпредприятий проводят один раз в год; быков хозяйств и продуцентов крови биофабрик и биоцехов после завоза в стадо, в последующем — 2 раза в год с интервалом 6 месяцев; животных элеверов перед отправкой на элеверы и в карантинный период на элеверах. Неблагополучным по лейкозу считают хозяйства (отделения, фермы, стада, дворы), в которых диагностическими исследованиями выявлены инфицированные ВЛКРС животные. В этих хозяйствах вводят ограничения. Коров исследуют серологическим методом (РИД) через каждые 4 месяца до получения двух подряд отрицательных результатов. Реагирующих в РИД животных изолируют и в течение 7 дней сдают на убой, в том числе коров независимо от сроков стельности. Телят последнего отела от реагирующих в РИД коров сдают на убой независимо от возраста.
Молоко от инфицированных коров используют животным группы откорма после обезвреживания (кипячение). В случае если зараженные ВЛКРС животные не изолированы, то до сдачи их на убой молоко от всего стада подлежит пастеризации в хозяйстве при температуре +76 °С в течение 30 с. В случае выявления клинических признаков болезни молоко подлежит утилизации, а животное — немедленной сдаче на убой. Молодняк в неблагополучном хозяйстве (телят) исследуют в 6, 12, 18 месяцев и перед вводом в основное стадо. Реагирующих животных изолируют и в течение 7 дней сдают на убой независимо от возраста. При ветеринарно-санитарной оценке туш, внутренних органов и других продуктов, полученных от убоя больных лейкозом животных, руководствуются следующим: при одновременном поражении лимфатических узлов, скелетных мышц и других органов (генерализованная опухолевая форма лейкоза), тушу и все продукты убоя направляют на техническую утилизацию; если поражены отдельные лимфатические узлы или органы, но нет видимых макроскопических изменений опухолевого характера в скелетной мускулатуре, такие лимфоузлы и органы направляют на техническую утилизацию, а тушу используют в порядке, предусмотренном для мяса от вынужденного убоя животных.
Быки-производители с положительной реакцией при исследовании на лейкоз подлежат немедленному убою, а запасы спермы, полученные от них за последние 6 месяцев, уничтожаются. В неблагополучных по лейкозу хозяйствах проводят дезинфекцию реагирующих животноводческих помещений и оборудования, после выявления и удаления животных. Хозяйство, в котором сдан весь инфицированный скот старше шести-месячного возраста, и получены 2 отрицательных результата с интервалом в 4 месяца, а в последующем при однократном исследовании коров и телок в течение 2 лет не выявлено инфицированных животных, считается благополучным.
Мероприятия по профилактике и ликвидации лейкоза в личных подсобных и фермерских хозяйствах заключаются в следующем: населенный пункт (подсобное, фермерское хозяйство) считаются благополучными, если в них серологическими исследованиями на протяжении 2 и более лет не выявлено животных зараженных вирусом лейкоза, а также не зарегистрировано клинических или опухолевых случаев болезни; в благополучных населенных пунктах (подсобных, фермерских хозяйствах) серологические исследования животных проводятся 1 раз в год; после получения положительных результатов исследований на лейкоз инфицированных животных изолируют и в течение 7 дней сдают на убой, населенный пункт объявляется неблагополучным. До сдачи инфицированных коров на убой молоко от них после обезвреживания (кипячения) используют в пищу людям или скармливают животным; при наличии в населенном пункте, личном подсобном хозяйстве нескольких голов крупного рогатого скота, после изоляции и сдачи инфицированных животных, оставшихся исследуют серологическим методом на лейкоз с интервалом в 4 месяца до получения 2 подряд отрицательных результатов, после чего населенный пункт (подсобное, фермерское хозяйство) считается оздоровленным.
Руководители сельскохозяйственных предприятий обязаны принимать меры к оздоровлению от лейкоза личных подсобных и фермерских хозяйств граждан, проживающих на территории этих предприятий, с целью недопущения распространения болезни и заражения животных, оказывать им содействие по замене инфицированных ВЛКРС животных здоровыми нетелями и первотелками.